Page 45 - e-magazine

Mar - Apr 45
จากเครื่องมือพลาสติกที่ใช้ในห้ องปฏิบั ติการ
ดร. แอนน์ ซาดา หัวหน้าห้องปฏิบั ติการ หน่วยวิจัยโรคเมตาบอลิก ศูนย์
การแพทย์แห่งมหาวิทยาลัยฮาดาสซาห์ พบปัญหาในการใช้เครื่องมือพลาสติก
ปิเปตทิปที่ใช้ งานในกระบวนการวิเคราะห์เป็นประจำ �ทุกวั นนั้นปลดปล่อยสาร
เคมีออกมาทำ�ให้เกิดผลบวกเทียม (False positive) ในการตรวจวินิจฉัยผู้
ป่วย ปัญหานี้ เกิดขึ้ นเมื่อเธอเปลี่ยนไปใช้ปิ เปตทิปสีฟ้าที่มาจากรอบการผลิต
ใหม่จากผู้ผลิตและตัวแทนจำ�หน่ายเดิม สารที่หลุ ดออกมาจากปิเปตทิปคือตัว
ทำ�ละลายสี NP-10
จากบทความงานวิจัยทั้งหมดแสดงให้เห็นว่าการใช้พลาสติกแบบใช้แล้วทิ้ง
ในห้องปฏิบั ติการต้องคำ�นึ งถึงการหลุ ดลอดของสารเคมีที่เติมลงไปในพลาสติก
ในขั้นตอนการผลิตเพื่อลดต้ นทุน บางชนิ ดเป็นส่วนประกอบจำ�เป็น บางชนิด
สามารถเลี่ยงไม่ใช้ ได้ สารเหล่านี้เมื่อปลดปล่อยจากพลาสติกจะส่งผลกระทบ
ต่อการวิเคราะห์และการวินิ จฉัยโรค การเลือกใช้ปิเปตทิป หลอดไมโครเซนทริฟิวจ์
และเพลทให้ปลอดภัย ผู้ผลิตจะต้องมอบข้อมูลและการรับรองเครื่องมือพลาสติก
และไม่มีการเติมสารเคลือบแม่พิมพ์ หรื อสารเติมแต่ งอื่นๆ
ปิเปตทิ ป หลอดบรรจุสาร และเพลทที่ ใช้ในห้องปฏิ บัติการควรได้
รับการรับรองมาตรฐาน ผลิตจากโพลี โพรพิลีนบริ สุทธ์ เท่านั้น ปราศจาก
พลาสติไซเซอร์ (Plasticizer) สารฆ่าเชื้อจุลินทรีย์ หรือสารเติมแต่งอื่นๆ
ที่ไม่จำ�เป็น กระบวนการผลิตไม่ใช้สารเคลือบแม่พิมพ์ ช่วยให้ได้ผลการทดลอง
ที่เชื่อถือได้
สำ�หรับการทำ�งานที่ต้องการความไว ความถูกต้อง และความแม่นยำ�สูง
ต้องเลือกใช้ ปิเปตที่ช่วยเพิ่มความสามารถในการทำ�ซ้ำ � (Reproducibility)
และช่วยลดการสูญเสี ยสารเคมีราคาแพง ตัวอย่างโปรตี น DNA และ RNA
ที่เก็บหรือบ่มในหลอดพลาสติ กทั่วไปจะสู ญเสียไปบางส่วนเนื่องจากถูกดูดซั บ
เข้าสู่ ผิวพลาสติก Protein LoBind tube/plate และ DNA LoBind tube/
plate ลดการสูญเสียตัวอย่างได้ดีที่ สุด ด้วยการลดการจั บตัวของตัวอย่างบน
ผิวหลอดและไม่ใช้ สารเคลือบใดๆ บนผิว
ภาพที่ 3: ค่าคืนกลับ (Recovery) ของโปรตีนหลังจากเก็บเป็นเวลา 24 ชั่วโมง เปรียบเทียบ
ระหว่างเพลท Protein-LoBind จาก Eppendorf กั บเพลทโพลีโพรพิลีนมาตรฐาน ตรวจสอบ
ด้วยการวั ดค่าการดูดกลืนแสงฟลู ออเรสเซนต์ของโบวีนซีรัมอัลบู มินที่ติดฉลากด้วย
ฟลูออเรสซีน (Fluorescein-labeled BSA)
Figure 3: Protein recovery within 24 hours between Eppendorf Protein -LoBind plate
and Standard polypropylene plate by using fluorescence adsorption from
fluorescein-labeled bovine serum albumin (BSA)
problem. Pipette tips were used in her every day assay released
some chemical to made false positive in patients’ diagnostic
results. The problem started when she switch a batch of blue
tips to another batch fromthe samemanufacturer and supplier.
A dye-solubilizing agent called NP-10 caused this effect.
All the articles showed the use of disposable laboratory
plastics need to consider leaching issue. Some chemicals were
added during production process to reduce cost, some are
unavoidable for production others are avoidable and have been
shown to influence assays and diagnostic. To safely select anduse
of pipette tips, micro-centrifuge tubes and plates, manufacturers
have to provide information and certificated for their plastics
consumables. No slip agent or other additives need to present.
Laboratory pipette tips, tubes and plates should come with
proper certification. All consumables use only virginpolypropylene
as raw material that is certified free of plasticizers, biocides
or other unwanted additives. The production process works
without slip agent to help you obtaining reliable scientific results.
Particularly applications with high sensitive, accuracy and
precision, the pipette tips could increase reproducibility and
notably reduce the loss of expensive reagents. Protein, DNAand
RNA are stored or incubated in standard vessels, these samples
can be lost due to adsorption to the plastic surface. Eppendorf
Protein LoBind tubes/plates and DNA LoBind tube/plates
maximize sample recovery by significantly reducing surface
binding of sample and alsowithout the use of any type of coating.
Article info
• Alla Katsnelson. (2008). Leaching plastics throw lab assays.www.the-scientist.com/blog/print/55172
• Holt et al. (2009). G.I.T. Laboratory Journa 9-10: 24-26
• Holt et al. (2010). GABAA receptor sensitivity to contaminants which leach from plastics. Poster Neuroscience
• Lewis LK et al. (2010). BioTechniques 48 : 297-302
• McDonald et al. (2008). Science 322: 917
• Saada et al. (2009). Nonylphenol Ethoxylate Plastic Additives Inhibit Mitochondrial Respiratory Chain Complex I, Clinical Chemistry 55:10, 1883–1890
ภาพที่ 4: ปริมาณโปรตีน (แองจิโอเทนซิน I) ที่ความเข้ มข้น 10 พิโคโมล และ 1 พิโค
โมลด้วยวิธี MALDI-TOP mass spectrometry เปรียบเทียบระหว่างหลอด
Protein -LoBind จาก Eppendorf กับหลอดโพลีโพรพิลีนมาตรฐาน
Figure 4: Protein (Angiotensin I) quantitative analyzed at 10 pmol
and 1 pmol result from MALDI-TOP mass spectrometry using Eppendorf
Protein-LoBind tubes and Standard polypropylene tubes
ENTRY No. a007